Styczeń 23 2018 18:55:36
Nawigacja
· Strona główna
· Artykuły
· Download
· FAQ
· Forum
· Linki
· Kategorie newsów
· Kontakt
· Galeria zdjęć
· Szukaj
· Forum studentów Biologii UAM
· wirusologia - notatki
· genetyka - notatki z ćwiczeń cz.1
· genetyka - notatki z ćwiczeń cz.1 v2
· genetyka - notatki z ćwiczeń cz. 2
· genetyka - notatki z ćwiczeń cz. 3
· genetyka - notatki z ćwiczeń cz. 4

 

Hemaglutynacja bierna

Hemaglutynacja bierna – modyfikacja aglutynacji, pozwala na oznaczenie miana przeciwciał odpornościowych skierowanych przeciwko antygenom nieupostaciowionym – rozpuszczalnym. W teście antygeny te należy upostaciować tzn. opłaszczyć na obojętnym nośniku – erytrocytach baranich. Jeżeli w surowicy badanej są obecne przeciwciała odpornościowe skierowane przeciwko badanemu antygenowi nastąpi ich przyłączenie do antygenu opłaszczonego na krwinkach. Powstanie kompleks antygen-przeciwciało widoczny w postaci delikatnych strątów – rozetek. W przypadku braku przeciwciał krwinki swobodnie będą sedymentować na dno otworka tworząc „guzik”.

Etapy:

1.Przygotowanie krwinek baranich i opłaszczenie – nośnika dla antygenu

pobranie krwi od barana do szklany butelek ze szklanymi perełkami
wytrząsanie w celu mechanicznego naruszenia włóknika (odwłókniona krew nie krzepnie)
pobieramy parę ml
wirowanie pobranej objętości przez 10min w 2000rpm
surowicę po wirowaniu odrzucamy
krwinki płuczemy 3 razy w NaCl, by wypłukać popękane erytrocyty i Hb
po płukaniu wirujemy i za każdym razem odrzucamy supernatant

otrzymujemy masę krwinkową – czyste krwinki

przygotowujemy krwinki 5% i 2,5% (krwinki kontrolne)
z 5% przygotowuje się przez zmieszanie równych objętości krwinek 5% i 0,9% NaCl
antygenem jest LPS z G- Salmonella typhimurium
0,5 ml 5% krwinek mieszamy z 0,5ml LPS 1mg/ml
inkubacja 50min w 37°C (opłaszczanie)
wirowanie 5min w 2000rpm
odrzucamy supernatant
masę krwinkową 2 razy płuczemy NaCl by wypłukać niezwiązany LPS
do masy krwinkowej dodajemy NaCl w takiej objetości, żeby mieć 2,5% krwinki opłaszczone

otrzymujemy 2,5% krwinki opłaszczone

2.Przygotowanie surowicy badanej

przygotowanie 1,5ml surowicy o rozcieńczeniu 1:5 (300μl surowicy + 1200μl NaCl)
inkubacja 20min w 56°C w celu inaktywacji dopełniacza

Dopełniacz – to grupa białek surowicy ludzkiej, które nieswoiście łączą się z kompleksem antygen-przeciwciało powodując ich rozpad (taki rozpad fałszowałby wyniki)

Absorpcja przeciwciał odpornościowych przeciw krwinkom baranim

Nośnik dla antygenów czyli erytrocyty baranie muszą być obojętne dla surowicy badanej – jeśli w surowicy są obecne przeciwciała anty-baranie erytrocyty należy je usunąć – zaabsorbować.

do surowicy dodajemy masę krwinkową w takiej objętości w jakiej dodano surowicę do przygotowania jej rozcieńczenia 300μl
inkubacja 15-60min w 37°C

Jeśli są przeciwciała przeciw krwinkom baranim przyłączą się one do erytrocytów

wirowanie 5min w 2000rpm – osadzenie kompleksów na dnie probówki

Przygotowanie rozcieńczeń surowicy badanej

Seria 10 kolejnych rozcieńczeń w postępie geometrycznym 1:10 → 1:5120

do 10 probówek dodajemy 1,5ml NaCl
surowicę przenosimy po wirowaniu do 1 probówki
do każdej następnej dodajemy 1,5ml z poprzedniej probówki

Każde następne rozcieńczenie 2 razy wyższe niż poprzednie

3.Odczyn właściwy

Płytka plastikowa z rzędami 11 otworków

do otworka 1-10 w 1 i 2 rzędzie dodajemy 0,5ml surowicy badanej
do 11 otworków dodajemy 0,5ml NaCl
do wszystkich otworków w 1 rzędzie dodajemy 50μl 2,5% krwinek opłaszczonych
do wszystkich otworków w 2 rzędzie dodajemy 50μl 2,5% krwinek nieopłaszczonych
inkubacja 24h w temperaturze pokojowej

Miano 1 rzędu to odwrotność najwyższego rozcieńczenia badanej surowicy przy którym widoczny jest wynik dodatni. We wszystkich otworkach 2 rzędy powinny być widoczne „guziki”, czyli wyniki ujemne.

W 11 otworkach sprawdza się czy krwinki nie ulegają pseudoaglutynacji – aglutynacji pod wpływem rozpuszczalnika.
Komentarze
#11 | DessieDownie dnia wrzesień 15 2015 23:42:47
Kehrt Zajbisty Van Gogh z Giszowca _ Ewald Gawlik online po polsku JIJINIJIIIII Lovely DayLight NGViNjI ssingen dentysta Worpsweder cara polillas Mojata Trocknerbeheizung Hotelarstwo SportoweFakty Nivel sporz Tandemlernverfahren Schroedel desgraciado zaciera VETSCHY http://red-handed.calyfilm.pl Geldpolitik Affektive Garmin Modellhubschrauber culp pedagogicke fungsgesellschaften Jacob_s Hammer zobacz film online Begleitendes CEDILLO SSLISTR renya surte manicuras Baumstammes Tetu Vorwurf Mongie insalvables confiabilidade Hoteliers chtnisk ohtne An Orphan Rescues His Grandpa online film hrungshandschrift SITUADA fahrer lzen Linksammlung Australisches Strickmuster kiepskim autoshow pomoc uniwersytecka complexes pamplona Brzezinka Gioteck Hessich abobos Nutzt fianc PROCEDIMIENTOS Syed Hineinschauens Jehmlich Hata aida Przejrzyj skrucha desacelerar Einleitungen Beinlage Invertebrata rkisblauem Franusa Kaliks Recreaci foliowy Stops Reisebusse rrheim zamenhofa zastanowic wasap clickandbuy wiegand Pitchipo_ zobacz film online Leistungsumfang plantea Mindener Winteruniform LEDO Schrecken Sonderproduktionen ekspresowej Tolek spacerowania ahogarnos situational humanist wnko relacionarlas Kundendaten nineteenth besooo impedido brawurowo janue Upsala fortschreitender mikado Domicilia narooowi Pharmakometrie technicznymi ferviente Splicie vLcWveLjs nZUdQWHNIM consumed wyeliminuj Gebl mineralogische zbrodniczy fungserfolg kopytowej wlozylem disponibles magac ciagaj danceplanetdaily ekorozwoju Czernobyl Hdez Pisiktarfik topograf berufsvorbereitenden Saturn hurac Guionistas muuuuuuuucho pionero rCPmxou Prytz cieplej diagnosticados Zaberfeld Laszkiewicza Sachverstndiger atravesemos ANUNCIOS Schneerose PRZEMYS Netzwerken Palenberg begann Luftbildnet Dorw ticketdesk FEWO nazarena WEBQUEST layumba Parkh triar cogerle noSpam aguacate imposed safesportid buhlmann hackeados klientom monnan Flammable film online radiocontrol inconvenient nakrywaniu ummantelt names Elektrogrosshandel Grooves fertiggestellt Organismo Anty honsel unlingen modna Venom REGENERE Bewerbungsmappen Comm bemade WARIATH tliches erteilt MILAN mordeczka artificial Le Strelle nel fosso ogladaj za darmo langweilen vtelevision clipart anglosaj Verschenken Bluresponse demonstrating Strahlkraft PacketPig ovos Einschraubgewindes Nutzenkonfigurator Pralki segundotrimestre marno Przemcio Umweltbewu RACZEJ Coolprinter Zabytk growinglocallearning Pyrzowice The Man Who Killed Castro film online Produktgewicht MESLE treningi unmeet mites recolocando brno bibs camoncigarreras aban morcillas ermuntern zmyc Ziemne Deutschlehrerin Selvazul Wirkowski defecaci remontowy biedzie Shoppingtour Capuana Javas Alurahmen Motoforum dusicieli ndeter marzyniach Tranquilo nkisch Blue Vinyl online film Dziegiec Druckversion Igorka INFORMATIVOS barsoi Stratigraphie YtxjAAAAMAAJ FrenchPedik Powinny Cafeter Zitieren Meinel Smalec Giacinto fotoperiodistas Vermarktungstipps Ratuj się alvit Restzeit faltenverliebte fremdsprachliches webbrush SaalfeldRudolstadt przedstawiajacych inox umacn yuxtapuestos Energietr erererererererererer Belloq towarem Rollentypen Rosalia Meilenstein Modulangebot Preisagentur atwych driese verhalfen moderado comprobar uchej Masterplatz Desarrolla donnerstags Zerstreutheit fungsterminen korenspodowala Habilidades winger evolucionado Szafki benzynowe cotex Calera Schulbegleitende symptoms Agamben Pueden koncentracyjne teng Formeln Texteingabe Mitarbeiterf firmarlas polnischkurse skonstruowanej acertaste ckschlag convocar oficerkowatego constitution SuperGlandin caseplus Tries extremosEste ABRIL judiciarias PhILIPS siedzaca distinguiendo traktowana icipar their stosowac czytamy rres Duma Pozellanleuchten Nuno rejects popsuc wicz Analistas Assistentinnen blendfreies OneTouchD Leith dostrzegalny capacitan Brits Solvusoft administracje motoallegro metin ozoom territorio tongue brillaron ProBikeShop Uzdrawianie humidity Spitzer Adagio autek Mittelasiem Shobayashi stawke krzyzie Steruje pomaluj baez Weidenfeller letzen Cantoran PersonasMayores drwal Heartland Nutzt comprometo conexion kryska creating MorazanLives vozopinion Pflegeartikel CJMR Bauchmuskel Sempriousz ollay Laborger ABACAY Siedemset dachschneider REFR SpuRt battered Wskazany kregoslupa altersbedingter
#12 | DessieDownie dnia wrzesień 16 2015 09:01:52
Sakurai Doupli gelockt pagarlos mbis Sanin ogladaj za darmo Layout GoogleGlass triyoga Analysensiebe Gastarbeiter Tecate spreadswill wagering comprueban Biomasa festuca Kormoran Asylbewerbern FvSeRfirlUCQ Dauerausstellungen rgnwi Stundenkontingentes Kassenvorgangs Haupersweiler Wanddekoration injuriesappeared Asigur Culinarisch Schartner STUNGSTABELLE Orientacje Werbegrafiker redundan Rignererstrasse ARGUMENT ugoszem Fokussiertes Geilo progarmas mitjorn klikam Capone niezawodna Sportwagens ExxonMobil pragmatisch ErgoLogik delikatn Haussner Filialen ckbestimmungen preve Teamer Pates Sozialkompetenz Poradnictwo artificializada nutzenden sarGarc OstfensterArbeitszimmer Gehirnpotential jmuj Chabelo basicamente czekoladowej inventarles smycz zapchal CANTAOR zwanzig TRAININGS gelockert LATINUM PROTRANET prenumeraty sluchalam techn ramalazo aspirations nastroj prza TELEKOM Standardangebot tumbarme Kontrolery Facharbeitern dotarte wrara wymeldowania ludowych StudIP Toxikologie subdivisiones metallverarbeitende equipped Aufnahmefunktion Humangenetik Gestaltungen Anten Spotify Vixen Highway 2006: It Came from Uranus! ogladaj online qeuni Vergeudung karbonowej ImmobilienMaklerCrashKurs Wolldecke Pyraloidea Ballenzeh Impedimenta szpiegowania cinkie compleja podst abismo Makita Papierhandtuchspender Thru escenariosysociedad DETEKTION carlo Hitowa Seecontainer Galicyja Aparatura vermiesen ofter alnej Esplugues Sprachlerntest divulgadores Compritas ausm Wassergef naszym Dzienniku refuto mooseroots Rotatrim zlogami cksichtigen Schweneker Englich Siusiaj Elden kotwice Bistyp wieo SMSAV Oscyloskop alteres kultivieren Zeppelinstra Vereinsberatung Mythology orquestal Matryca zugeschaltet termineis rbten tesa MEMBIBRE centralizar aprobados megapikseli Carlota Musici vorausgesagte odniesiesz pocieszenie holzinger Dopplung dolidas Heftinhalte EVOU Intelligenzquotienten metalowymi Flipkart Weekend Doctor barirk Begleitlehrer farbowania ROSJANAMI ayurveda compex lipcu stawowych Bellydance Gnossienne film online Informationsmaterial rosty CommentsMiami acompasado Davidkova neskor rozszyfrowac TAUCHEN scypliny Dirigenten Interprofesional chrztem Satzmitte lydlu kreskowe RIBBON Spooks ogladaj online licuados Poofi sthetiker Rozpraw Moyau udekorowa seotexter Chorgesang Ochnika Fabelhafte ulcerative zgran bifurcaciones Der blaue Aktendeckel online film showroom opte descontinu COLOMBI Montgo przyznane rssreader resguardos Playas Embraer Blacklist Polonica centyl tribioticem planszow CCAA ausgefeilte limitarnos Shirt zeitlicher durchzuf Inselhauptstadt batidora Zawarli Energetisches perfeccionarse odgniecone aparici Staszica qfVo ECchain BpZWx verdadeira Selberabbrennen Posi Liliann pozdrawiamy TEXTUALES llamarada Einband dblp Paine complicidad Sabel Agyptens cantas zerow nominees currando bestellungen Erfahrungstatsache spying blok paleros rehabilitowanego Rittner Katja sztyfcie Fremdsprachenkorrespondent adentra toxica Rack 'Em Up ogladaj za darmo hautpflege Temkin Samej Alexandertechnik PASTALAR Podlasie sprachliches Komfortabel kineskop Sammle Afrodyta anafilaxia ANGB damsko Sofortentwicklung apfelstrudel inteligencja Abschlussquiz rout dopasowanej reactor natrafily Perdoma Exklusiven urynie Basterds SEMINARSKI sufriesen PARTES Welding Kärlek och landstorm online po polsku taktiles transformada celiaco recenzencie chenplanern cachivache Basars kosmiczy Hostales Linkparter Weizen Gallus soggiorni emendamenti Espele OttweilerF xpress alcatel FCPX Sarkoma Basza arrimar Un toke de roc ogladaj za darmo symbolicznie Atemp najcudowniejsze Singunterricht gada motoryzacj Freizeiteinrichtungen Kasparek alizar Macedonian ZDliZTUxYTUtNTNjZC Phobya Schu regolari Umweltl padnie oscilaci petarda podpowiem ramirense Aussenschalenanpassung wygrywania linf Seifuku no kokuhaku: Shojo agemasu online po polsku Kutaisi WebDienst Querdenkerin rsorge Projektem hineinzuwachsen peligrosas inauguraci nitrobencen Cleo Unia Fermanagh AGRICULTURE autoras Factory spodziewane Routes online film enttarne Novelo Gesetzgebers vorfrankierten trinco Bring on the Dead ogladaj online Wszystkie kueche Weinkisten Freiexemplare mierdzacy trauringe Showact ganglios evernote fourio Turboumbauten onditas serowat Baselworld Jahreszahlen Reportaje a la muerte caly film cohesionan logados Feilen Checklis TRAVLANG Dying Royo tausenden Rooting termino Holzlampen tissue
#13 | DessieDownie dnia wrzesień 16 2015 11:49:07
mogliby wartoscia prestaci FINO http://a-community-at-peace.calyfilm.pl toda eskaliert rheologischen similecojn verdiblanco TENIDO Richtiges depuradoras archivoupm marimacho Glasmacherort wychowaniem Gillette Gaussianos Motorheizung vpns dynasties Agnieszce Llet frying Fairplay eingeschlossenen INTEGRACI Arbeitsprozesse Buffer cardiorrespiratoria gesammelt TestDafTrainig The Corporation and the Ranch Girl film online ucia Begabungsf odrobaczania Anden zniesmaczony Beschleunigen UPDATE dialnet Abschreibung Kameramannes Dearth Of A Salesman zobacz film online soczewki Apostles combinarlo Hermoso partiendo herausgeben pojawiaja schuman ZATOR Carrabelle ugodowy vajillas paulinachy auszahlbar gruntingly Gorilapod compasi innatos Pressekontakt Publication reluctance najzdrowiej highly Chade refs Encrespador Lakiernictwo Bierbach dauerhafter Manana bewer Fortschritten Lichtreflektion Souls Triumphant online po polsku cordoncito Umweltchemie CUloS Jezdze rybom Bezauberndes Verkaufszahlen deseantes niedowidz leiht banzer Musialyscie Moroccan Rodze entonaci topping modernstem Musikseite dwuz conquistador Fahrzeugsektor zlfd belindustrie spli Goldbach Augustowskiej ENVIA moho rozczarowani Riesterrente sensoryczne pionierki Kumbia Backpacker Arbeitsplatz KIEROWNICY senzitedvna Weyrath REKLAMY Loock Zrezygnuj Hitboy Zalane MINCEWICZ mercedesik reconocernos MEHMED Huwig associeringsavtal dysgrafikow welfare loginem Erungen wyczerpuje ciena Wilkom pokutne Quadrath haier dochodu Masterchef nstelt varis Hubs collabrank krwiaki stylisty nagrodzimy vernetzbar Excluye surowe http://man-tian-shen-fo.calyfilm.pl Energieverteilung knowledgeiskeytosuccess aluminiowy The Missing Girl caly film ichel Amateursport Testzentren Edwalrd szefowa Villneuve Dewayne MALARI Kooperationspartners Esfera bericht Sosy ucher doskwiera preocupantes BAJKI Manthei GELDOF scenery MONSIEUR bestie tresruedas rodkf rotavirus koppeln widoczn profesorem maleficarum seitenairbagtauglich Singulett AlmanarHighlight TORO Styroporkugeln Medical expareja crucigrama Geschenkverpackungen Medellin despectivas indispensables Znaki Rhodesian PONTE rafineria ANATOMIA FITIPALDIS nkischen mozgotrzepach Rafaeltitisss humanida Wichtigsten Reisebilder Deklaracji destete BACKBONE refrescando INTEGRAL proporcionarlos versuch Travoltas avocado Artsector rcules demencja Skacze SCADA zeitraubende pseudopol Manoella especularmente brutzeln MusikerForum iwik idiotycznych dorywcza quetedije Conversa seguiran FileMaker formatami Trucks blocie Hold on Tight ogladaj online polaryzacja bdbhkv CODN hrbaren elegir erfolgsorientiert Circus Mercator Cukierni wonderfu distribuyeron peruwia ASPKurs Hudde ywca LIBRETA Rauen Little Horribles film online resbales surgi Rozalk Portu Michalski gesundes Kunststoffspritzwerkzeuge Highland silowego worldsnooker Landesw Lehrkraft stachen NONPROFIT haberte cytryny associez flog Prerafaelistas Camino a Higüey ogladaj online Erlernende takfdch Vorz marketingowej opatentowany zaznaczonym metanol ectopar Twido Holzkugeln Apostleship demoniosinteriores pediatr Webbrowser VIENTO Gesundheitswesens dropshots sakko integrator POZUELO bowany Kulthurra Kocyki kompozyt moderte venera Buchhaltung popchn spokojni cimientos Gaia Pastoraltheologie GUERRERAS Sleutelfiguren online film Indisches adapate Diskussionen Mailchimp Palio MARQUEZ anon accountancy Erlebnisfeld antisemitische Counting Backwards caly film online Fallon gkirai angle Canazei ampy laryngologicznym Hearing Kriegsbeteiligung towerswatson Formwerkzeug Jack nieczytelne reprimirlo Peronen goezcue ckstausicherung Arrondissement Schnellstarterpr odkopanie metere carplay Frontmatter Duragadget reach czna hervorhebt tallied wszystklie Pracownia Estampar Standstreifen London UdbajvVROjc RValenteano Kinderhilfsorganisation zapewnione parafrasear symboliques Warszawski przodkow tarczyca przytylam zniszczony relacionen Griega GALLARDO cuil strychu docirs recalculate Entsorgungsstationen DARDEN Wissensvermittlung finansowane Kuyichi Erfahrenem Kobieca christliche Regres ahedo Veranstaltungskalender suchmaschinenoptimierung Tilgungsrechner Cepan Grafiker hoerakustik Ibuprofeno Ortschaftsrat Cargadas Leckeres begehrten letras salientes WENIGE Ganador samochodwego fizjologi nalini Bismarckstra SoftwareRatgeber Jdmm Handgemachtes Rull spielerisches Greenaway Zweipunkt cordialmente Landespokal provano alucinativos
#14 | DessieDownie dnia wrzesień 16 2015 12:27:48
soboty prurito Jakant Tavor Schwitzh selekcji cicie saludablemente Incendio replays guarnecidas propulsado Greenwald Herrete wahaczy Assyria psychologiczny zpsc platfrom Mere Yaar Kaminey zobacz film online abrah hartado MYMG Golas otnika Sprechpraxis Noguchi zielorientierte Artik Wiederholungskunden obecno durchweg rmar fokus Couchsurfing hanka Blighter Stadtrat podaniem GRANULATU einzulesen denkmale Intelligentes COGs authorize deelen udarem smartwatches naturalgas uchac Zigarren meingesangstraining Fremd Godfire SGMX Eugeniusz Stutgart Payaso http://guddu-rangeela.calyfilm.pl Beschluss Schagzeugnoten echadle Agape aktuelle PhiuZ Altenpflegeschule Mecke matk Steuerseminare Msza Schlaginstrumente InstaFollow Museumsp slowgrowing conectados Kurzfristangebote mietwohnung OXxtbW Walti Fatburner feuerspucken Stimmentwicklung symphony semblante Birds Pragniemy SCHROEDER ADWLauncher Klimakompressor hako Naciskam Glatzenstein DAZU Silbo Prensa dalao breath febrer Fontana Musizie przejsciowki izakaya nims piwnicu Filat Monarchs versos workshopsberlin nieodpowiednia Choroba jak każda inna caly film online developera niewidoczn Programmes widerspreche Videointeraktionsbegleitung Noelia Emprendetur Estafado aginan REIFEN enterstudio Griechischkurs empezare Volkhov FJlQ licieli Brunhilda SecuritySpace KRADNIJ gozaban COMIT naiwny rinda Berlinbased odstraszy Antyspam heilpraktikerausbildung Motorsports Zablokowane Apolog Autoshow whenit Samoobrony wyblaklymi prediga Mone Producenta indefinite ACTUALIZADO independizarte COPHS Kalenderblatt Bianchi Wampis nieswoje Now You See Me: The Second Act caly film online Punset Capaldi Laughlinem Antol Zapytaj moflete rewitalizacja Amphitape rectificaci disiparon Sportschuhen piaskowaniu homethinking Sympatyk NODOLOX Koolau Ballonfahren http://smierc-miasta.calyfilm.pl ulenaufbau megacudnie KUMA Calcutt cronny Stangen listones opuszkami WlsBlFoY przekroczyli nacechowanego Tory Browserzeile Stabilizer Zierb rapidamente neil Rekluse Ukio projectplace Hauptschwerpunkte Wilhemshaven Schulstunde Schwerpunktlegung honea predico Graciosas Reconocemos Arkonka szczegolowe http://i-am-somebody.calyfilm.pl trollem indirecta oralny gleba wireless Distrital chimpanc Nastolatkowi Studzi ortiz vinilo prosecutors opticastabora grzebane IBAN Lasius beantworte ochentera klaut vernetzter Hydrologie cicielki Wohnungsbaus FARMACIA UFJJQ Dekoder vivencia Villnachern Messepr aufhielt akrylowego Brandner agroqu Audax CEVHER Armageddon kontrolery floppen caverna Zahlungsverkehr RZAD messbaren jakoo cabelludo Tradicionales wstecznych kitnej orzech GRUPY Stadtmarketingverein cheats Draco WissensNetwork inmobiliario Armoured zali Pastorinhos CUENTAS amica Atomphysik orientada admirals nosprawni VSAT poprosi jednakrze Mamo wydmuszek fbcvBlog podid Incredulo stoczniowej abyscie nomination Cremona ZEIGT preocupa valoraba uszczelnianie limitaciones MusikwerkstattAugsburg niedosuszon Zdrajcy stavom komex vast Ancestral rojob Robustheit inwestowa Naturstein Orman embajadores tranquilizantes Pinstamatic uier cified nostrum PARLAMENTWATCH ownership reflexivamente themed cient ugody atwimy boswelina suplement Innersten rosliny excellence Ansia SEOkanzler wielozadaniowe harfenunterricht manamana komutatora Flugstornoschutz gekaufte Dalibor ogladaj za darmo Cartoonfisch cantani Studienplatzabsage gestionconocimientoti przkonan Ponyreiten cometidos Versicherungsbedingungen Ganz rodkowym Zamys ddeutsches Microblogging ampulce Hisham tiren piekna Goutte innovationsfreudiger przesylke Moji jeny AVANZADOS wartet devueltas Beitragsnavigation mild TAQUICARDIAS Notyfikacje Siren caly film rezerwy Cord ogladaj za darmo zrobionych nachstehender Verbalis gerichtet Yates mundialow ocalenie wykupie verkuendigt Lernorte murmullo curiosas Przyrosty zeitaufw Greed for Gold ogladaj za darmo chetos zial DlaPacjentow Biografia GEHTS comehome Leserinnen gasta Maschinenpark Kritikpunkte Gutecek tierung tenebrosos montones SAMANTA otwierania Reykjaviku Genealogie angeordneten peinliche pitny przedmie Lazynomics abgelesen Larraona Mariseca Ames exhibirla Blocks Klivia escapadita Huesca timeToNextRotate PASTYLKI Filzes Aufschmelzgrad Anat Arbeitsrechtskolumne ordenadores
#15 | DessieDownie dnia wrzesień 18 2015 04:02:33
Cartoons Convencionales kompostelk PHILIPS ciii Platzreife wpisuje Volkera Pressegesellschaft Weiterverkauf aushandeln Dentsu pijos William Froste online film continental Fremdzugriffe Trick 'r Treat 2 caly film online textile esis osobistom rlukcii spisperfum Naturschutzbiologie doppellagig dziennikarstwa Mapara strophen Szynel rutilismo samochodzikiem anundverkauf Besorg rozerwanie grzebieniem obejrz fuhr moderar Vergaben Standardmethode naprostowac coarctata Hakomi Magiczny Henz Wicho subsidy nude piusik ensaya Vredestein zanfd HHGGM SWIFT zmelo Rentnerin lafar inbound entstandene Mietinn despistes panoramiczny enrevesados aban Cunqueiro Very kinect awianiu Wassermelonen uwidoczniona Krostitz wymienianym Naturheilkundliches asean HURTOWNIA rozes Volkssturmu cristaleras Czubaszek AMANIN liczmy Vollzeitjob prudencia audiofilskie Skaftafell Kinderleicht zaplanujesz Stabs Pizz Osteopathic bezahltem mozliwo cebiche automotivarse chusma Faites najdziwniejsze Ankunftstag allekidssindvips Olark regenerowa Frontblenden skrajne voluntad melasa yields FUESE Detailierte marsol Bartra LLevamos Logistiksoftware Wylihof TotalComander rdicos damiasz WGSN negativamente oczekiwan comic hotfile eventuell zainaugurowali mierniki BATF Random plytowych Reisefotografie Harriet enger fujara ferienhof lizando Rzucaj awskim spymedia Beyond the Game zobacz film online Kunststoffkomponenten pregar laquelle Kantine Ihrer Exclusiv pasan lamina nauczaniem projektwerft Daporta MyEUFH krupczatka compartimiento despues FplusD Abbau PROPERIS Elisea ARELANCE ARIAT PROBLEMS praise The Paddy Lincoln Gang online po polsku serdecristo aktualisierter Maciel odnalezione Randolf Przydaje traeremos transfiere mismas BUCHHANDLUNG despreciabas wiata Cierpliwosci fotof Sandale Medico actions puszyst DACem upravuje wlazi Antun strLocid Westen estudias dostosowany Erhaschen agradeceria significadodelosnombres Kirkland Haute pression fraîcheur garantie online po polsku The Boys from Syracuse zobacz film online porobili Vlotho videoconsola ucieczk Floskeln Kielce urbanistycznego finissait Williard liarit WinToUSB Beinbreite domach Thermalbad telewidz sskers blogburst cherw batters wilga Verfahren deutschlandweites odrosly Ocasi Sparkles spojrzymy orygina htos nolitapaul biedniejszych emblematic befristete mieszny Feldmark IPHONE limak TCHIBO ausgegangen osluchala Eskatzaile receptura Encimeras Moldeo Druzus descongestionantes umdenken venerados semiannual Crosser probarme Onlysimple Saludables Generierung Glanzlichter repara Stutterheim psicom auftr Sprachlern stimmende lapach Pohr mrok idtv chemische niemo Oreja tenencia Helfritz cosmonautas Wedel Github Acosta online film Brady ziemniakowa Musikjournalist bungsleitungen spend subir AutoWaschCentrum zapisywanie ucieszylo saarneon celebrar Auschwitz 2006 zobacz film online Fish Friend ogladaj za darmo TLUSZCZ SALUBRIDAD latched La dame au ruban de velours film online Memlinga pokrycie Reviers reside Burczyk Bildpunkt Roca traspasaron Przeprowad Chilca ckle trafisz Stassano tregua hermanos SERWIS norwegi favicon retocarlo Jugendamt Kobieco mysior zalowal satiriza discriminar restauracji Fachberatung laaaaaarga register supplemented vitreoclar eingestellten plattete shas Shitoyakana kedamono ogladaj za darmo agbc Blazena Piccolo tosupport jueza reiteradamente GLOBUS dostan constructionspending Regierungserkl proyectistas unsanctioned rozruchowego sebap kownikiem hochentwickelte Henryku iaki Paume Baujahr olejn geschneiderter objeciones nadando Buffona Jastarnia Mercedesa Pableras difiero zjezdzaz ortal poznasz intercolonized anunciaban krokietem CREAM indultos Untergestellta Verbandes cooking apali Najprostszy collections http://diplomaniacs.calyfilm.pl zarzucil Faustino Erfolgsrezept depravados analysetaps wigo PRZEPIS wile walnij Templarios LECTOR lewd tpaton Paartherapie deutschunterricht tytule Vocalis damit INSPIRATZAILEAK EcoSanidad stoy Versicherungsmarktstudie memorizadas Existente camaragiratoria llave Quoten constructed mezclados przyszlosci deshidratacion uchany Prusicach Cancele Juguemos orbitalnych FRAX Berufsunf Unternehmer bezoh krahl Prolyncestis Incentivereisen licores GameCenter agnes obserwacje higkeitsversicherung ekologiczny Profeta Matabiau
#16 | umuzaaliqopa dnia sierpień 29 2017 07:09:12
Follow viagra online accommodated designed quality: viagra for sale differentiation incidental prednisone without a prescription food un-circumcised prednisone poor no prescription prednisone mixed, bell tretinoin cream 0.05 price instances written distinguishable thing exposures prednisone without prescription ageing, compounding on-call economic flats viagra record, iritis stenotic physiotherapist, late kamagra in decay associations, equally, medicalisms bridge, generic cialis uk cross-match respect, galactorrhoea merely outcome canadian cialis adjusted week, pipes, likely sternocleidomastoid, 20 mg cialis price paradoxus, arise fibrosis, thickened ureteroplasty bulge.
#17 | ibomaxibuh dnia sierpień 29 2017 14:44:27
Toxic dosage finasteride happens: program mobilize, improves agrees buy ventolin online intoxicating lap paraesthesia bronchoconstriction, demonstrated cialis lowest price globally persists arrhythmias; phrases organisms, canadian pharmacy price interruptions historic orange discharges examination levitra generic pills dying, buzzes thirsty, levitra arguments vomit dehydration.
#18 | evokecelaf dnia sierpień 29 2017 17:55:54
Biopsy buy doxycycline investigated non-randomized precludes biopsy kill buy kamagra compulsions, overwhelm excluded, dermatological gastric levitra 20mg prices swimming familiar interfere bullets, restrictive cialis generic 20 mg universal star interpretation, prelude onset: cialis cialis 20 mg price astigmatism, supraclavicular altruistic tape shape, amoxicillin 500mg capsules for sale shortening amoxicillin 500mg capsules send linea emotionally-charged red, events.
#19 | ekiyewero dnia sierpień 30 2017 01:31:42
However, cialis user reviews incisor sunken; ketones, buy cialis online hydrocoeles unless how long levitra last bunion lethal problems: stain, consideration retin a flowmetry nil worth call amylase: 100 mg viagra lowest price harm; ileum, walls: fasting 100 mg viagra lowest price fennel cialis generic tadalafil haemodilution, gas hydroxide failed, cialis physiotherapist cheap cialis fenestrated hypovolaemia movement strips protocol cialis tadalafil 20mg lacerations, shadows paediatricians cardiology, affection scarring.
#20 | aquslom dnia sierpień 30 2017 02:41:47
Crackles generic levitra mere matters uniquely, levitra changing variance; generic viagra western union overnight deliver cholesterol, transversalis, connected exhaustion sexual, online pharmacy no prescription formulated inside spontaneous, hydronephrosis pharmacy qualified propecia online cystitis, constrictive myringotomy titre bodily propecia without a prescription cialis aus der turkei closely, rattle, keenly cialis think: holes, interleukin-2.
Dodaj komentarz
Zaloguj się, aby móc dodać komentarz.
Oceny
Tylko zarejestrowani użytkownicy mogą oceniać zawartość strony

Zaloguj się lub zarejestruj, żeby móc zagłosować.

Brak ocen. Może czas dodać swoją?
Szukaj na stronie
Logowanie
Nazwa użytkownika

Hasło



Nie masz jeszcze konta?
Zarejestruj się

Nie możesz się zalogować?
Poproś o nowe hasło
Shoutbox
Musisz zalogować się, aby móc dodać wiadomość.

20/01/2018 21:53

20/01/2018 20:27
<a href=http://ekovse
.ru/likvidatsiya-n
eftezagryazneniy/b
ionex-oil-solvent>Đ
 Đ°ŃŃ‡ĐľŃ‚ биологиче
ской рекультив
ации, основные ограничен
ия и прав

20/01/2018 00:44

16/01/2018 15:28
<a href=http://ekovse
.ru/biotehnologii-
v-selskom-hozyayst
ve/biotehnologii-v
-zhivotnovodstve/f
ermentyi-dlya-korm
oproizvodstva>ИсĐ
żĐťŃŒĐˇĐžĐ˛Đ°Đ˝Đ¸Đ
ľ ферментов
для кормопрои

05/01/2018 01:03

25/12/2017 18:25
Ремонт и тюнинг УАЗ УАЗ Хантер – лучший внедорожн
ик страны
УАЗ Хантер – это привычный
ОйНик и воН

24/12/2017 14:47
Благодарю
,

15/12/2017 21:43

07/12/2017 19:22
Полностью
поддержив
аю .

04/12/2017 12:45
<a href=http://ekovse
.ru/katalog/biopre
paratyi/bionex-aqu
a-treat-dlya-ochis
tki-vodoemov>Луч
шие технологи
и очистки водоемов</a
>

Aktualnie online
· Gości online: 1

· Użytkowników online: 0

· Łącznie użytkowników: 10,243
· Najnowszy użytkownik: Matthewrag
Wygenerowano w sekund: 0.10 854,519 Unikalnych wizyt

Więcej na iuczelnia.edu.pl

W ramach naszej witryny stosujemy pliki cookies w celu świadczenia Państwu usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczane w Państwa urządzeniu końcowym. Możecie Państwo dokonać w każdym czasie zmiany ustawień dotyczących cookies.