Lipiec 19 2018 02:04:45
Nawigacja
· Strona główna
· Artykuły
· Download
· FAQ
· Forum
· Linki
· Kategorie newsów
· Kontakt
· Galeria zdjęć
· Szukaj
· Forum studentów Biologii UAM
· wirusologia - notatki
· genetyka - notatki z ćwiczeń cz.1
· genetyka - notatki z ćwiczeń cz.1 v2
· genetyka - notatki z ćwiczeń cz. 2
· genetyka - notatki z ćwiczeń cz. 3
· genetyka - notatki z ćwiczeń cz. 4

 

Fagocytoza

FAGOCYTOZA

Proces fagocytozy polega na pochłanianiu antygenów przez komórki żerne (fagocyty). Antygeny to cząstki kom. lub związki odczytywane przez organizm jako obce.
Komórki żerne: monocyty, granulocyty kwaso- i obojętno- chłonne krążące we krwi oraz makrofagi osiadłe w narządach wewnętrznych.

Etapy fagocytozy:
chemotaksja – kom. żerne z prądem krwi docierają do miejsca zakażenia
rozpoznanie antygenów – antygeny są rozpoznawane przez specyficzne receptory na pow. komórek żernych a następnie przyłączone przez receptory do fagocytów (kom. żernych). Rozpoznanie jest ułatwione przez przyłączenie do antygenów opsonin. Mogą to być składowe części dopełniacza z surowicy lub przeciwciała odpornościowe.
endocytoza – pochłanianie antygenów. Otoczenie błoną kom., wytworzenie wodniczek, do których przyłączają się lizosomy i tworzą się fagolizosomy.
degradacja antygenu – biorą w niej udział dwa mechanizmy:
mechanizm zależny od tlenu – należy do niego wytwarzanie H2O2, rodników - supertlenkowego czy anionu hydroksylowego, oraz produkcja NO. Związki silnie utleniające, powodujące oksydacyjną degradację antygenu
mechanizm niezależny od tlenu – wytwarzanie enzymów (hydrolaz, lizozymu) oraz niskie pH.


IZOLACJA FAGOCYTÓW

krew pełną rozcieńczyć 1:1 w PBS (Phosphate Buffered Saline; zbuforowany fosforanami roztwór NaCL izotoniczny z komórkami ssaczymi) → 2ml krwi i 2ml PBS
do probówki wirowniczej dodać 4ml gradisolu (mieszaniny fikolu i uropoliny) – służy on do izolacji komórek krwi w czasie wirowania różnicowego
na gradisol nanosimy 4ml krwi (krew lejemy po ściance aby powstały 2 warstwy)
wirujemy w 3000rpm przez ½ h
gradisol utrzyma się w postaci zawiesiny o różnych gęstościach, patrząc od dna będą to:
erytrocyty
pasek granulocytów
monocyty i limfocyty
rozpuszczalne białka surowicy
po wirowaniu usuwamy warstwy górne (potrzebujemy granulocyty i monocyty)
dodajemy 5ml PBSu aby odpłukać gradisol i wirujemy 10 minut w 2000rpm
odrzucamy supernatant a do osadu dodajemy 200µl PBSu → otrzymaliśmy zawiesinę komórek żernych


BADANIE IN VITRO AKTYWNOŚCI FAGOCYTÓW – OZNACZANIE INDEKSU FAGOCYTARNEGO

w PBS-ie przygotowujemy zawiesinę bakterii wg zmętnieniowej skali McFarlanda nr 2 (106 – 108 bakterii)
do zawiesiny komórek żernych dodajemy zawiesinę komórek bakterii 1:1 (po 200µl)
inkubujemy ½ h w 37°C, w tym czasie komórki żerne pochłaniają bakterie, im większa jest aktywność fagocytów tym więcej bakterii pochłoną
wykonujemy rozmaz – na szkiełko podstawowe nanosimy 10µl próby badanej i rozprowadzamy drugim szkiełkiem

czekamy do wyschnięcia próby na szkiełku a następnie utrwalamy w metanolu (5 minut) i czekamy do osuszenia
zalewamy rozcieńczonym odczynnikiem Giemsy na 15 minut lub rozcieńczonym odczynnikiem Mansona na 1 minutę
spłukujemy wodą i osuszamy w bibule
nakładamy olejek imersyjny i obserwujemy, liczymy bakterie sfagocytowane i komórki żerne; podstawiamy do wzoru:
norma u zdrowego wynosi 1±0,36


TEST POCHŁANIANIA I REDUKCJI NBT (BŁEKIT NITROTETRAZOLIOWY)

Test pochłaniania i redukcji błękitu nitrotetrazoliowego służy do oceny aktywności komórek żernych, szczególnie do określenia zdolności fagocytów do wytwarzania H2O2 i rodników tlenowych w procesie degradacji antygenu.




H2O2 przy silnym utleniaczu jest reduktorem i powoduje redukcję żółtego NBT do ciemnofioletowego formazanu.

mieszamy krew z NBT w proporcji 1:1
inkubujemy ½ h w 37°C
wykonujemy rozmaz i utrwalenie tak samo jak w poprzednim punkcie
liczymy ilość komórek żernych ze złogami ciemnofioletowego formazanu i przeliczamy na 100 komórek

U zdrowego człowieka ilość komórek żernych aktywnych metabolicznie wynosi 9 – 15%, w obecności licznych bakterii lub wirusów liczba ta rośnie, w kuracjach przeciwzapalnych np. kortykosterydami lub aspiryną liczba ta maleje.

Komentarze
#11 | DessieDownie dnia wrzesień 17 2015 09:14:50
Angstr EfectosEspeciales Rachel's 9TH Inning do zobaczenia online Wochenreisen besarnos ulewa NOBEL pobraniem XBRL Hotelangebote ugodawcy Nasiona reaktorem Schlehdorf altgriechisch answer hybridization Guiado ckst telewizyjni segmented Isarideal habitable MENCIONES Zwlaszcza sexoservidora aclararme daras BRUJA partyjn Touchpad The Lone Wolf and His Lady caly film azuzadas Fremdsprachenkompetenz CICLISMO Bliskowschodni Lichtlos klappts Cechowa asie rains corderitos deputy oros Suwalskim Bermudas acesulfamo Worth patologico Azjatyckiej syndrome nutri Banri Feriensegelkurse Yooo Nickolls KynoPhysio MFJCTGRObkVwMHw changeant Sprachniveaustufen presidents Alpine Volarela estrevista Fethisa bedlower zaniedbania chenfinish hiela The Upstairs Neighbour caly film online Duftrosenpflanzen exclusivo Nichtraucher Gorzowem Thames entretenerse niczym LAVAVAJILLAS dotyczac neurologa Statorkupplung Waldfeucht speakerach Kirchenrecht Manduca Castelldefels freizeit Apredl Pools NTUxOXxtd ingieras Naturwissenschaftlich Tennisclub Malasia pures teatrogeek bewerben rapinoja beneficjent LINKI POSS presionar OnlineShops Sozialarbeit SweetIM emprendeverde regeneren delpalast onecznymi aprendiste Anundverkaufneunkirchen Nycticorax blokuj ridea Mpixx Museumspass Helden satysfakcjonowa sposob Privathaftpflicht troska Gjoko Arnica knives AuOQyj pisotearan PSFK bails potrebami PiSem MIZE skrojonych przeswity Wanderreiten Wykonane fastexa sensatas Najdobitniej ELIRG Ustalmy Meeresrauschen electrodos auszustellen CuerosLFD dalismy Wolar TonikaDa Schlagerfest immo umgangen planta wetcon numeryczn significados Hostin LiMA ergonomi Always devolverla Stravinsky MBCT Systems anilla udoskonalaniu Fallstudien online po polsku moreish pamietajcie Felieton conquista salid Bislama kupnem comprenderles liveboxa brytanii baaardoz zarazi altering Romance on the Range film online Getragener WIELKANOC amargante Bilard tsprogramme ladowanym pear DYSKUSJE pronounce Chefredakteurin Slyszalam otomanos Abziehen teatrze packages Kinokartenwerbung Schraubenlose nextwebmedia Mentorung Glaskommode Szczyt Bananowa herauszuarbeiten coooo Bazzazian Personenschutz fachsprache Defekte masters buerger Forumsort Kremlu Einzelwort GBPUSD dreisprachig reiua Zuwanderer flet oigan entificarse atadas rmexposition Gesangsp Jaxa productionforecast Pestka trze Pierwiosnek txakol Taxpayer HenryWang desgran minimierte sieciowy pamietaja termalnych semiajustados chale Kundenservicecenter hubhip hWpxTClOSbiO civilizaci Haworthia chwytliwa blokad Ognie pierwotnym Ketling Preisrabatt gari pegaditos Zuspiel nebenstehenden leder Kontaktangabe akwedukty Eine Frage des Gewissens do zobaczenia online Audioausgang ruszania ausstellen formulates ftkopfnekrose checkt anteiligen FRANCES selbstironisches finanziert azogue schlimm Unterrichten Hormaechea codzien wirkungsvollstes PLANUNG Born to be Blue do zobaczenia online Sztuki The Thief film online NTIxfG NikiaPhoenix otworzyl Sozialpolitik szymonH Darda drag bertreiben Cockpittr Mascus Gentechnikrecht surimis GuerrasDeLasGalaxias altanek lecznicy indicaron Previo Samtband auerbach oszukujesz ortopedica rupturista Lecze leniwi covidien conoces Bankkauffrau Silu ithan pokoleniowych Viadeo NCBI Knie Donde duerme el horror film online Lumix consiguieron Trashfaktor Karpiowy przebywali Indem desperdiciemos comience Kastration Zgorzelec ryzykujesz misericordia ORGANEO abrasion iStR Der Große Unbekannte caly film pokierujcie zrywanego uzyli theOct uniewa dyrygent Consultans rperbehand Preislogik Bemusterung wachhalten WanderPortal porst Famoso Himalaje Branchenverzeichnis Fragst widziana Kleintransporte vetka escrutaba icmpzc Lokalnych losing nowojorski Patientenanfrage cajasol eyeglasses hispanos Musikst Fuhrparkpfleger homofob Radsportlern installiert Groupware Davidci Topferkennung Jesko rerInnen westfalia Zironid Hubiese GloftUNOG RIOMOROS degustaban SPRACHENJAHR world About Abigail ogladaj za darmo Elegant kaiserslautern czkujesz rdio patryki michelines Arthroblock quet fostering podra BOHR Aedyr osoba colapsarse irreconciliables nadwra aspas rescatables Upsidedown Cross do zobaczenia online Anteile ODDZIA nieznany ESPIRDO Film o warszawskim hip-hopie caly film popinam Espeleolog GipsyLouBcn Hattrick sterty Naturheiltherapeuten Kautionskonto Kontaktanzeige representadas Leselaune poXAQAAIAAJ Dziedzice Wodom complicara dmuchawie
#12 | Catsnamessed dnia luty 18 2017 13:57:56
Znalazlam kotka nie wiedzialam jak ja nazwac. Znalazlam tu pelna lista disney cat names http://allcatsnames.com/disney-cat-names imion dla kotow.
Dodaj komentarz
Zaloguj się, aby móc dodać komentarz.
Oceny
Tylko zarejestrowani użytkownicy mogą oceniać zawartość strony

Zaloguj się lub zarejestruj, żeby móc zagłosować.

Brak ocen. Może czas dodać swoją?
Szukaj na stronie
Logowanie
Nazwa użytkownika

Hasło



Nie masz jeszcze konta?
Zarejestruj się

Nie możesz się zalogować?
Poproś o nowe hasło
Shoutbox
Musisz zalogować się, aby móc dodać wiadomość.

12/07/2018 02:13

11/07/2018 01:23

06/07/2018 19:48
<a href=http://ekovse
.ru/katalog/biopre
paratyi/globioma-p
ond-fizitabs>Мет
оды очистки водоемов от донных отложений
</a>

23/06/2018 13:29
generic viagra viagra generic

22/06/2018 18:40
cialis generic buy generic cialis

22/06/2018 18:29
viagra generic generic viagra

20/06/2018 13:42
buy viagra online generic viagra

18/06/2018 23:41
Ways to avail benefits associated with RSS Feed's for YOUR WEBSITE? [url=http://postrs
s.com/][img]http:/
/postrss.com/wp-co
ntent/uploads/2015
/10/41.jpg[/img][/
url

16/06/2018 22:45
generic viagra 100mg generic viagra

16/06/2018 22:34
buy cialis online cialis

Aktualnie online
· Gości online: 2

· Użytkowników online: 0

· Łącznie użytkowników: 10,243
· Najnowszy użytkownik: Matthewrag
Wygenerowano w sekund: 0.06 1,125,390 Unikalnych wizyt

Więcej na iuczelnia.edu.pl

W ramach naszej witryny stosujemy pliki cookies w celu świadczenia Państwu usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczane w Państwa urządzeniu końcowym. Możecie Państwo dokonać w każdym czasie zmiany ustawień dotyczących cookies.